Estudio molecular e inmunohistoquímico de lesiones precursoras de cáncer de cuello de útero

Résumé

El cáncer de cuello de útero es la segunda causa más frecuente de cáncer en las mujeres de todo el mundo. Con una incidencia de 317,000 nuevos casos y una mortalidad de 190,000 mujeres al año. Esta claramente demostrada la intervención del virus del papiloma humano (HPV) en el desarrollo del cáncer de cuello de útero, son numerosos estudios los que demuestran esta relación. Se ha demostrado la presencia de ADN viral en el 95% de los casos de este tipo de cáncer. La activación del ciclo celular constituye un paso crucial en el desarrollo de prácticamente todos los cánceres humanos. Mediante la expresión de las oncoproteínas virales E6 y E7, ciertos genotipos (HPV de alto riesgo) bloquean las proteínas celulares pRb y p53 provocando un estado de activación continua del ciclo celular, creando así un estado permisivo para la aparición de mutaciones no reparadas e inestabilidad cromosómica. La alteración funcional de los reguladores del ciclo celular todavía no es bien conocida y parece tener elevada importancia en la patogénesis del cáncer cervical, por ello nuestro proyecto se centra en aclarar el papel de los reguladores del ciclo celular en la progresión de las lesiones escamosas intraepiteliales (LSIL) a cáncer cervical. Además de p53 y pRb como dianas de las oncoproteínas virales E6 y E7, ciclinas como la ciclina D1 e inhibidores de ciclinas como p16 son proteínas clave en el estudio de las alteraciones moleculares que caracterizan el cáncer cervical. Ki-67 es una proteína no histona expresada en el núcleo durante el ciclo celular, excepto en las fases tempranas G0 y G1. De todas formas es un eficiente marcador de proliferación celular y ha sido asociado con el aumento de grado de la displasia cervical y por tanto puede tratarse de un marcador adicional de pronóstico en el cáncer cervical. Además, Ki-67 puede ser útil para diferenciar atipia no diagnosticada de SIL. Recientemente, estudios de perfiles transcripcionales y de microarrays de ADN han identificado dos proteínas del ciclo celular, la proteína 2 de mantenimiento del minicromosoma (MCM2) y la topoisomeresa 2 alfa (TOP2A), cuyos genes se encuentran sobreexpresados en el cáncer cervical, y se cree que actúan en la fase temprana S permitiendo el reconocimiento del origen de replicación y la relajación del ADN. ProEx C es un marcador inmunohistoquímico recientemente desenvolupado para la detección de las proteínas MCM2 y TOP2A. Recientes estudios han corroborado la utilidad de este marcador en muestras citológicas como test para ayudar a los patólogos a diferenciar lesiones normales o benignas de cáncer cervical y lesiones precursoras. En este trabajo nosotros realizamos un análisis inmunohistoquímico y genotipado de HPV con los siguientes objetivos: ¿ caracterizar el patrón inmunohistoquímico de los reguladores del ciclo celular p16, ciclina D1, Ki-67, p53 y ProEx C y su relación con el grado histológico de las lesiones cervicales en una cohorte de mujeres de la Región de Murcia ¿ observar la relación entre la expresión de estos marcadores en condiciones cervicales benignas y SIL ¿ evaluar la relación entre la expresión inmunohistoquímica de estos marcadores y los genotipos de HPV ¿ caracterizar los genotipos HPV y los patrones inmunohistoquímicos de estas proteínas en lesiones AIM (Atipical Inmature Squamous Metaplasma) y compararlos con los encontrados en las lesiones precursoras LSIL y HSIL.